Tsukuyomi est un dōjutsu du Mangekyō Sharingan, l'un des genjutsu les plus puissants. Après un contact visuel avec sa cible, Itachi Uchiha l'enferme dans une illusion de sa propre conception. Grâce à sa capacité à déformer la perception du temps, il fait vivre à la victime des jours de torture ininterrompue en quelques secondes : coups infinis, cauchemars répétés, traumatismes du passé. Le monde à l'intérieur de l'illusion ressemble souvent à un négatif aux tons gris et peut être complété par une lune rouge sur un ciel rouge.
En raison de la puissance du Mangekyō et de la vitesse instantanée de l'effet, les méthodes ordinaires de levée de genjutsu sont inutiles contre Tsukuyomi. Après la fin de l'illusion, la victime tombe généralement dans le coma. Les détenteurs du Sharingan peuvent brièvement garder conscience, mais seul un porteur de Sharingan très expérimenté peut se libérer. L'utilisation de la technique exige une énorme quantité de chakra et sollicite fortement les yeux, si bien qu'Itachi ne peut pas poursuivre le combat après l'avoir employée, et sa vue se détériore. La seule capable de guérir les dommages psychologiques causés par Tsukuyomi est Tsunade.
