Tsukuyomi es un dōjutsu del Mangekyō Sharingan, uno de los genjutsu más poderosos. Tras el contacto visual con el objetivo, Itachi Uchiha lo sumerge en una ilusión de su propio diseño. Gracias a la capacidad de distorsionar la percepción del tiempo, hace que la víctima experimente días de tortura ininterrumpida en cuestión de segundos: golpes infinitos, pesadillas recurrentes, traumas del pasado. El mundo dentro de la ilusión a menudo parece un negativo con tonos grises y puede complementarse con una luna roja en un cielo rojo.
Debido al poder del Mangekyō y a la velocidad instantánea del efecto, los métodos habituales para disipar genjutsu son inútiles contra Tsukuyomi. Tras finalizar la ilusión, la víctima suele caer en coma. Los portadores del Sharingan pueden mantener la conciencia por un breve tiempo, pero solo un portador del Sharingan muy experimentado es capaz de liberarse. El uso de la técnica requiere una enorme cantidad de chakra y sobrecarga mucho los ojos, por lo que Itachi no puede continuar el combate tras aplicarla y su visión se deteriora. La única capaz de curar el daño psicológico causado por Tsukuyomi es Tsunade.
